PRACTICA DE VDRL-USR

Antígeno de cardiolipina para investigar reaginas de la sífilis en Suero sin inactivar, en Plasma y      L. C. R. (no requiere reconstitución)

INTRODUCCION.

Treponema pallidum la bacteria que causa la sífilis, una enfermedad que generalmente se transmite por vía sexual.

Su diagnóstico puede ser serológico, con lo que se pueden determinar dos clases de anticuerpos:

1.       Tipo “cardiolipina” no treponema e inespecíficos.

2.       Antitreponemas específicos.

La prueba realizada Venereal Disease Research Laboratory VDRL se le conoce como una prueba para sífilis no-treponemica. Es parte de la exploración inicial de la sífilis e iniciar un tratamiento. Con el método cualitativo empleado la placa presenta floculación, si se presenta el caso se lleva a cabo el método cuantitativo con el o los sueros positivos.

También se emplea en el cuidado prenatal del embarazo, así como parte de los estudios de laboratorio prenatales.

REACTIVOS Y MATERIAL:

·         Antígeno de suspensión estabilizada (VDRL)

·         Control positivo

·         Control negativo

·         Pipeta desechable

ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO.

El antígeno VDRL y los Sueros Controles son estables hasta su fecha de caducidad indicada en la etiqueta cuando se almacena de 2°a 8° C NO CONGELAR.

MATERIAL Y EQUIPO NECESARIO NO PROPORCIONADO.

·         Placa cóncava (indispensable)

·         Agitador mecánico

·         Cronometro

·         Microscopio

METODO CUALITATIVO.

1.       En un anillo de la placa cóncava depositar 0.05 ml de suero problema.

2.       En anillos diferentes colocar una gota de suero control positivo y en otra por separado una gota de control negativo, extender sobre la superficie de los anillos.

3.       Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado previamente re suspendido en cada una de las muestras utilizando la aguja N. 21 sin bisel.

4.       Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm durante 4 min. Las pruebas realizadas en un clima extremadamente seco puede provocar la evaporación de las muestras; por lo tanto la placa en rotación puede ser cubierta con una tapa de caja Petri húmeda previamente con grasa.

5.       Leer inmediatamente al microscopio con objetivo y ocular 10X.

INTERPRETACION.

1.       Control positivo.

Presencia de floculación mediana o grande.

2.       Control negativo.

Ausencia de floculación.

METODO CUANTITATIVO.

1.       Seleccionar los sueros positivos obtenidos en a prueba cualitativa.

2.       Colocar en una gradilla 6 tubos de 12X75mm y numerarlos.

3.       agregar a cada uno 0.5ml de solución salina a 0.9%

4.       depositar 0.5ml de suero al tubo No.1 y mezclar

5.       pasar 0.5ml de suero al tubo No.1 y mezclar.

6.       Pasar 0.5 ml del tubo No.2 al tubo No.3 mezclar.

7.       Continuar con este proceso al tubo 6.

8.       Depositar 0.05ml de cada una de las diluciones sobre los diferentes anillos de la placa cóncava.

9.       Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado (VDRL) utilizando la aguja No.21 sin bisel a cada una de las diluciones.

10.   Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm durante 4 min.

11.   Leer al microscopio con objetivo y ocular 10X

INTERPRETACION.

El título de suero problema será la última dilución que presente un resultado positivo.

CONCLUSION.

Esta práctica nos sirve para identificar la enfermedad de transmisión sexual sífilis es una técnica inmunológica rápida y sencilla de realizar.