TECNICAS MACROSCOPICAS COPROPARASITOSCOPICAS TAMIZADO

Se fundamenta en el fenómeno de la filtración, utilizando tamices de diferentes diámetros en donde quedan atrapados los parásitos (trematodos, cestodos, nematodos). Esta técnica permite observar directamente las características morfológicas de los parásitos adultos, enteros o fraccionados de los metazoarios.

 

MTERIAL Y EQUIPO:

Ø  1 coladera de tamizado fino

Ø  1 abate lenguas

Ø  1 caja Petri

Ø  1 pinzas

 

 

PROCEDIMEINTO:

1.       Colocar pequeñas porciones de materia fecal en la coladera con ayuda del abate lenguas.

 

 

2.       Dispersar la muestra con el abate lenguas y agregarle agua hasta lograr un tamizado lo mas limpio posible.

 

3.       Revisar cuidadosamente las partículas de las heces que hayan quedado en la coladera.

 

 

4.       Los parásitos encontrados colocarlos en una caja Petri con solución salina.

 

 

5.       Se identifica la parte del parasito o el parasito completo.

 

RESULTADOS:
se llego a encontrar Almidón y Celulosa


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'METODO DE CONCENTRACION POR FLOTACION DE WILLIS'

OBJETIVO:

Aprender a realizar diferente métodos para la identificación y estudio de los parásitos en este caso la búsqueda de huevos y quistes.

 

FUNDAMENTO:

Willis en 1921, describe este método basado en la propiedad que tienen las soluciones de densidad mayor de hacer flotar objetos menos densos.

Este método está recomendado especialmente para la investigación de protozoarios y helmintos. Consiste en preparar la materia fecal con solución saturada de cloruro de sodio.

Los huevos y quistes de peso específico menor que la solución saturada de cloruro de sodio tienden a subir y adherirse a un cubreobjetos colocado en contacto con la superficie.

 

MATERIAL:                                                         

ü  1 vaso de precipitados

ü  1 embudo

ü  1 gasa

ü  1 tubo de ensaye

ü  1 portaobjetos

ü  1 cubreobjetos 

 

 

 

REACTIVOS:

Ø  Solución saturada de NaCl

Ø  Solución de Yodo-Lugol

 

 

 

 

 

 

PROCEDIMIENTO:

1.        Tomar aproximadamente 1 gramo de heces fecales con un abate lenguas.

 

2.       Colocar la muestra en un vaso de precipitados y mezclar con 10ml. De solución saturada de cloruro de sodio.

 

 

 

 

 

 

 

    

 

 

 

3.        en un tubo de ensaye filtrar la mezcla con una gasa, llenando completamente el tubo.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4.        colocar un cubreobjetos sobre el tubo, de manera que el liquido haga contacto con el cubreobjetos.

 

 

5.         esperar de 5 a 10 minutos.

 

6.        los quistes o huevos flotaran y quedaran adheridos a la cara del cubreobjetos que esta en contaco con la muestra.

 

 

7.       colocar una gota de yodo-lugol sobre un portobjetos, retirar el cubreobjetos con cuidado para evitar perdida del material y ponerlo sobre el portaobjetos.

 

 

 

8.        examinar la muestra al microscopio co el objetivo de 40X, buscando quistes o huevecillos de  parásitos.

 

 

 

RESULTADOS:

 

 Entamoeba coli

 

 

 

 

 Huevecillos de Áscaris

 

 

METODO DE CONCENTRACION-FLOTACION DE FAUST

METODO DE CONCENTRACION- FLOTACION DE FAUST

OBJETIVO:

Buscar en las muestras biológicas la presencia de los distintos parásitos para tener un conocimiento más alto sobre ellos.

FUNDAMENTO:

Se conoce como técnica de Faust, ya que fue el quien la diseño en 1938. En este método se utiliza solución de Zn, cuya densidad específica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: Necátor 1.055. Tricocefalo1.150. Áscaris 1.110 y facilita que los huevos livianos de estos Helmintos, con menos peso específico que la solución, se concentren y floten. La concentración adecuada aconsejada es la que usa como reactivo una solución acuosa de sulfato de Zn al 33% con una densidad al 1.180. El agua utilizada diluye y lava la materia fecal. El filtrado con gasa doblada y evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en delgada película la superficie del líquido centrifugado con los huevos livianos de algunos helmintos.

MATERIAL:

·        Porta objetos

·        Cubreobjetos

·        Gasas

·        Tubos de ensaye

·        Embudo

·        Vaso de precipitados

·        Abate lenguas

·        Aza

SUSTANCIAS:

·        Solución acuosa de Sulfato de Zn

·        Agua destilada

MUESTRA BIOLOGICA:

·        Heces

PROCEDIMIENTO:

1)      Colocar en el vaso de precipitados 10 partes de agua destilada y mezclar bien una porción de materia fecal.

         

2)      Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de ensaye, ayudándose con un embudo pequeño.

         

3)      Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1min.

       

4)      Decantar el líquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente.

        

5)      Repetir el procedimiento hasta 2 veces hasta que el líquido sobrenadante esté listo.

   

6)      Decantar nuevamente el líquido sobrenadante remplazándolo por igual cantidad de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 minuto a 1500 rpm.

   

                                  

7)      Tomar de 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del líquido,  colocarlos en un porta objetos y mezclar con 1-2 gotas de lugol, colocar cubreobjetos. 

          

                                    

8)      Observar con el microscopio y reportar resultados.

   

OBSERVACIONES:

                        

                         

                                  

Método indicado para el diagnóstico de huevos livianos de helmintos (Necátor, tricocéfalos, Áscaris, H. nana)

VENTAJAS Y DESVENTAJAS:

Esta técnica es mejor para quistes y protozoos que para huevos y larvas de helmintos. El éxito depende de la exactitud en la densidad de sulfato de Zinc. El contacto prolongado con el sulfato de Zinc, puede deformar los quistes y dificultar su identificación, por lo tanto esa preparación debe ser examinada lo antes posible.

                         

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Practica Metodo C. P. S. Directo o En Fuerte

‘METODO COPROPARASITOSCOPICO EN FRESCO’

Material:

·         Muestra fecal

·         Aplicadores de madera

·         Portaobjetos de 25X76mm

·         Cubreobjetos

·         Solución salina isotónica

·         Lugol parasitológico

Técnica:

1.       En un porta objetos colocar                 2.  Con la punta del aplicador tomar una pequeña

Una gota de solución isotónica.                Muestra de aproximadamente 1 a 4mg. De heces.

                                                                        Con moco y sangre elegir esta parte para estudiar.

                

3 . Mezclar procurando hacer una              4. Quitar de las suspensiones fibras y otros          Suspensión en preparación delgada              fragmentos grandes.                                                                 y no un frotis.

                     

5. Colocar el cubre objetos lentamente.              6. Repetir el procedimiento con una gota de    Examinar al microscopio en forma sistemática      lugol en lugar de la solución salina                       

a seco débil y seco fuerte.

                             

VENTAJAS:

-          La sencillez y rapidez para llevar a cabo este método, además de la economía en su realización.

-          Ambos tipos de montaje se pueden preparar en un mismo portaobjetos.

-          Esta técnica es la más útil para encontrar trofozoitos de amibas y flagelados.

-          Permite observar la movilidad de los organismos la cual con mucha frecuencia es característica y sirve para hacer identificación exacta.

DESVENTAJAS:

-          Las preparaciones con lugol, pueden destruir las formas sensibles como los trofozoitos.

-          La muestra utilizada es tan pequeña que es tan poco representativa.

PRECAUCIONES:

-          Una preparación satisfactoria debe tener densidad ligeramente opaca, pero ser lo bastante delgada que permita leer las letras a través de esta.

-          Se debe ver perfectamente los elementos en la preparación, sin que dificulte la observación por el exceso de burbujas y detritos microscópicos.

-          En heces liquidas y semilíquidas hay que seleccionar el moco sanguinolento o los esfacelos delgados del tejido y en heces formadas, hacer raspados para obtener material de la superficie en varias partes de la masa fecal.

-          Utilizar intensidad lumínica baja.

-          Examinar por lo menos tres muestras antes de considerar negativos los resultados.

-          La materia fecal es potencialmente infectante, por lo que se deberá tener cuidados necesarios para su manejo.

1.       ¿Solución salina isotónica?

Sustancia con una concentración de solidos igual a la concentración interna de solidos de la célula. El medio o solución isotónico es aquél en el cual la concentración de soluto está en igual equilibrio fuera y dentro de una célula.

Observaciones:

Al realizar la práctica con dos muestras diferentes y   muestra se  obtuvieron los siguientes resultados:

Muestra 1. Con yodo lugol se encontraron fibras vegetales, almidón, bacilos. En la misma muestra pero con solución salina  se localizó  Fibras transparentes.

Muestra 2. Con yodo lugol se encontró fibras vegetales en la muestra y con Solución Salina Isotónica fibras musculares digeridas y no digeridas.

BIBLIOGRAFIA:

http://solucionisotonica-vok6.blogspot.mx/

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